发光细菌法检测——废水急性毒性检测

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　　一，相关介绍

　　发光细菌是一类非致病的革兰氏阴性兼性厌氧细菌，最适温度20～ 30℃， pH6～ 9，NaCl 浓度3% ，在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌，这种可见荧光波长在450～490nm 之间，在黑暗处肉眼可见。发光细菌法是利用灵敏的光电测量系统测定毒物对发光细菌发光强度的影响。

　　基于发光细菌相对发光度与水样毒性组分总浓度呈显著负相关伊< 0．05），因而可通过生物发光光度计测定水样的相对发光度，以此表示其急性毒性水平。

　　发光细菌法适用于水质、工业废水、污水体及实验室条件下可溶性化学物质的水质等急性毒性监测。水质急性毒性水平选用相当的参比毒物氯化汞浓度（以mg/L为单位）来表征，或选用ECSO值（半数有效浓度一一以样品液百分浓度为单位）来表征。

　　二，发光细菌法测定方法

　　1.新鲜发光细菌培养物测定法

　　将发光细菌接种于液体发光培养基中，在适当条件下(约20℃) 通气培养12小时(对数生长期)，用缓冲液稀释至适当的菌浓度后加入测试管中与试液混合10-20分钟，读出样品管和对照管的光强度。

　　2.发光细菌和藻类混合测定法

　　有些有毒物对发光细菌无直接的毒害作用，而对藻类有毒害作用，利用这一特性，把培养好的发光菌悬液和藻类悬液混合后加入测试管中与试液混合，经光照一段时间后测定发光菌的光强度变化。由于毒物对藻类的毒害而干扰藻类的光合作用，使之放氧能力下降，发光菌因缺氧其放光能力也随机下降，因此可以根据光合作用放氧多少而导致发光菌发光强度的变化来推算出毒物毒性的大小。

　　3.发光细菌冷冻干燥制剂测定法

　　将培养到对数生长期的发光细菌采用特殊方法制成干燥粉剂保藏于冰箱中，使用时取出加入缓冲液保温平衡5-10分钟，使其恢复到原来的生理状态和发光水平，然后用于测试。其特点是每次使用的发光菌具有相同的生理状态，对毒物灵敏性一致，易于定量测定，结果重复性，可比性好，操作简便，可长期保藏，这将是该技术发展的方向。

　　三，报告内容

　　1.实验室室温

　　2.采样地点、日期、时间

　　3.氯化汞浓度或样品稀释百分浓度与相对发光度的相关方程

　　4.样品EC50值

　　5.测定人及所在单位

　　四，图片示例

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